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大鼠肝竇內(nèi)皮細胞

簡要描述:尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發(fā),嚴控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務,可以提供高質(zhì)量的大鼠肝竇內(nèi)皮細胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

  • 產(chǎn)品型號:SNP-R006
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-04-20
  • 訪  問  量:469
詳細介紹
品牌其他品牌貨號SNP-R006
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應用領域生物產(chǎn)業(yè)

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一、細胞基本屬性

貨號:SNP-R006

產(chǎn)品名稱:大鼠肝竇內(nèi)皮細胞

物種:大鼠

組織來源:肝臟組織

細胞簡介:該細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細胞(SEC)是肝臟內(nèi)所占比例最高的非實質(zhì)細胞,位于肝竇腔與肝細胞之間,具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒有的窗孔結(jié)構(gòu)、細胞間連結(jié)松散、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時,肝竇內(nèi)皮細胞窗孔逐漸減少或消失,內(nèi)皮下基膜形成,產(chǎn)生類似于連續(xù)型毛細血管的結(jié)構(gòu),這一過程稱為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起,其過程極復雜,在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn),近年來受到廣泛關注。

方法簡介:分離的細胞采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:內(nèi)皮體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物大鼠肝竇內(nèi)皮細胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNP-R006)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


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