品牌 | 其他品牌 | 分子式 | H9 |
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貨號 | SNL-143 | 規格 | T25 |
供貨周期 | 現貨 | 主要用途 | 科學研究 |
應用領域 | 生物產業 |
一、細胞基本屬性
細胞名稱:H9(人T淋巴細胞系)
細胞別稱:H9; HT clone H9; HT(H9); H 9; H-9
細胞貨號:SNL-143
細胞種屬:人
生長情況:懸浮
培養條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養環境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養操作
換液周期:2-3天
培養基體積:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法:
1.混勻細胞,收集細胞培養基,900rpm離心3-5min,棄上清;
2.加新的*培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
3.補足*培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養;
注意事項:部分懸浮細胞會附著瓶底,輕輕晃動培養基或者吹打細胞面就會脫落,不需要胰m消化。建議使用培養皿培養,更適合吹打細胞操作,吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。
三、細胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格:200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法:
1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存
注意事項:凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
Tips:
1.細胞懸浮生長,形態各異,偶有小聚團,部分細胞會附著瓶底;
2.圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞,如果無法判斷,可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數確定細胞活率;
3.懸浮細胞密度維持1E5-5E5/ml之間,密度過低或者過高可能會影響細胞狀態;
我們推薦使用尚恩生物H9(人T淋巴細胞系)*培養基(產品貨號:SNLM-143)作為體外培養的培養基。
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