雙抗(青鏈霉素混合液)在細胞培養中主要起到抑制細菌生長、避免細胞污染的作用。具體來說,其作用可以從以下幾個方面進行詳細闡述:
一、抗菌機制
青霉素:青霉素主要通過阻礙細菌細胞壁的合成來發揮作用。細胞壁是細菌維持其形態和生存的重要結構,青霉素能夠干擾細胞壁合成過程中的關鍵酶,導致細胞壁合成受阻,從而使細菌細胞因內部滲透壓失衡而破裂死亡。青霉素對革蘭氏陽性菌有較好的抑制作用。
鏈霉素:鏈霉素則作用于細菌的核糖體,通過與細菌核糖體30S亞基結合,阻斷蛋白質的合成。蛋白質是細菌生命活動的基礎,阻斷其合成會導致細菌無法維持正常的生命活動而死亡。鏈霉素對革蘭氏陽性和陰性菌均有一定的抑制作用。
二、聯合使用效果
青霉素和鏈霉素的抗菌譜雖然有所不同,但二者聯合使用可以擴大抗菌范圍,起到協同作用。自然環境下(不考慮人為產生的抗藥性),對青霉素不敏感的微生物絕大多數對鏈霉素敏感,反之亦然。因此,二者聯合使用可以控制幾乎全部常見細菌,有效避免細胞培養過程中的細菌污染。
三、使用注意事項
濃度配置:雙抗通常配置成100x的母液保存,配置培養基時按使用濃度添加到培養基中。不同實驗室或不同細胞系對雙抗的敏感性可能有所不同,因此需要根據實際情況調整雙抗的使用濃度。
無菌操作:雙抗作為抗生素,其使用過程中需要嚴格遵守無菌操作規范,以防止引入新的污染源。
存儲條件:雙抗應保存在適當的溫度條件下,避免反復凍融和高溫暴露,以保證其活性和穩定性。
使用期限:配置好的培養基應盡快使用,避免長時間放置導致細菌污染或雙抗失效。